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更新时间:2026-05-14
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在构建基因工程菌、酵母或丝状真菌的过程中,利用绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因进行阳性克隆筛选,已成为分子生物学实验室的常规手段。传统的筛选流程依赖抗生素平板初筛结合PCR验证,假阳性率高且工作量大。引入LUYOR-3415便携式激发光源后,可在不破坏菌体、无需裂解处理的条件下,实现对数百个菌落的快速可视化初筛。
具体操作要点如下:首先,将转化后的微生物涂布于固体培养基平板上,待单菌落长出后,置于暗室环境。开启LUYOR-3415的蓝光通道(主峰约470nm),将光源垂直悬停于平板上方10-15cm处进行均匀照射。由于GFP在蓝光激发下会发射出明亮的绿色荧光,阳性菌落会呈现出清晰的轮廓,而阴性或自发荧光背景则呈现暗淡状态。
相较于荧光显微镜的单一样本观察模式,LUYOR-3415的大面积照射特性使其特别适用于96孔板或直径90mm平板的批量扫描。实验人员可先通过肉眼快速标记荧光亮点,再用枪头挑取对应菌落进行摇菌扩繁或测序验证。这不仅显著降低了后续验证的人力成本,也避免了因反复开盖观察可能造成的杂菌污染。建议在筛选过程中配合专用的GFP观察护目镜,以获得更佳的信噪比和视觉对比度。
