15300785991

article

技术文章

当前位置:首页技术文章诱导皮肤鳞癌模型 SOP 清单

诱导皮肤鳞癌模型 SOP 清单

更新时间:2026-06-10点击次数:43

实验操作 SOP 清单:3200 构建 UVB 诱导皮肤鳞癌模型

适用设备: 智能紫外辐照箱 3200 (UVB 312nm)


🟢 第一阶段:实验前准备 (Pre-experiment)

序号

检查项目

操作细节/备注

确认 (✔)

1.1

动物品系选择

□ SKH-1 无毛小鼠(推荐,无需脱毛)
□ BALB/c 裸鼠/小鼠
□ C57BL/6 小鼠(注意:对UVB耐受性强)

____

1.2

动物分组

□ 实验组(UVB辐照)
□ 对照组(假照/无处理)
□ 每组建议样本量:≥10只(考虑脱失率)

____

1.3

备皮处理

□ 若使用有毛小鼠,需在先辐照前24h剃除背部毛发。
严禁使用脱毛膏(化学刺激会影响皮肤屏障)。

____

1.4

设备预热

□ 开启 3200 电源。
关键步骤:空载预热 15-20分钟,待光强稳定后方可开始实验。

____

1.5

个人防护

□ 佩戴 XP-100 紫外线防护眼镜
□ 尽量穿着长袖实验服,避免皮肤裸露。

____


🟡 第二阶段:辐照参数设定 (Parameter Setting)

参数类型

推荐数值/选项

说明与目的

光源选择

UVB 312nm

模拟地表致癌紫外线,诱导DNA损伤。

辐照模式

定量模式 (Energy Mode)

推荐使用能量(焦耳)而非时间,结果更精准。

急性模型剂量

单次 200 - 300 mJ/cm²

用于短期诱导炎症或凋亡研究。

慢性模型剂量

每次 60 - 100 mJ/cm²

模拟日常日晒,每周2-3次,持续20-30周。

剂量摸索建议

阶梯测试

先实验建议设梯度:0 / 100 / 200 / 300 mJ/cm²,寻找最佳半致死量。


🔵 第三阶段:标准操作流程 (Standard Operation)

步骤

操作内容

关键要点

确认 (✔)

3.1

放置动物

将小鼠放入3200内部托盘,确保背部朝上,平铺无遮挡。

____

3.2

遮蔽保护

使用铝箔纸严密遮盖小鼠头部(眼睛)、尾部及生殖器区域。

____

3.3

设定参数

在控制面板输入预设的剂量(如 100 mJ/cm²)。

____

3.4

启动辐照

按下开始键,设备自动倒计时。期间人员远离紫外区域。

____

3.5

结束取放

听到蜂鸣声后,戴好手套取出小鼠,立即送回饲养室。

____

3.6

设备归位

关闭箱门,防止灰尘进入,关闭总电源。

____


🔴 第四阶段:术后护理与监测 (Post-op & Monitoring)

时间节点

观察指标

处理措施

辐照后24h

皮肤红肿、脱皮、水泡

观察急性光损伤情况,必要时给予镇痛或消炎软膏。

每周

体重、精神状态

记录一般健康状况,剔除死亡或濒死个体。

每2周

肿瘤计数

记录肿瘤数量、直径。通常>2mm视为阳性肿瘤。

终点取材

组织病理学

取肿瘤及癌旁组织,4%多聚甲醛固定,做H&E染色及IHC。


⚠️ 第五阶段:避坑指南 (Troubleshooting)

常见问题

原因分析

解决方案

模型不成功

剂量过低或灯管老化

1. 检查灯管累计使用时间(通常寿命500-1000h)。
2. 增加单次剂量或辐照频率。

小鼠死亡

剂量过高或全身暴露

1. 严格遮盖非照射区。
2. 降低起始剂量,延长适应期。

组内差异大

光斑不均匀或小鼠位置乱动

1. 确保小鼠在箱内分布均匀。
2. 使用特制鼠板固定小鼠。

背景干扰

对照组出现病变

确保对照组未受到散射光影响。


📋 实验记录表(示例)

日期

组别

小鼠ID

设定剂量 (mJ/cm²)

实测能量 (J)

皮肤反应 (0-4级)

操作员

202X-XX-XX

实验组

#001

100

___

___

张三

202X-XX-XX

对照组

#002

0

0

0

张三


设备维护提示:

  • 定期使用酒精擦拭石英玻璃窗口,保持透光率。


  • 若发现辐照时间明显变长才能达到设定剂量,请及时联系厂家更换灯管。


      文章仅供参考

          后台联系我们哦,上海仪橙

服务热线
15300785991

扫码加微信