LUYOR 便携式光源辅助烟草瞬时表达与活体解剖

一、 实验背景

在植物抗病基因工程研究中，常利用农杆菌瞬时表达系统在本氏烟草（Nicotiana benthamiana）中进行蛋白互作验证。例如，将诱饵蛋白（Bait）标记为 GFP（绿色），猎物蛋白（Prey）标记为 RFP/mCherry（红色）。实验的核心难点在于：如何在侵染 2-3 天后，快速确认哪些叶片区域发生了共表达，以便精准取样进行 Co-IP（免疫共沉淀）或 BiFC（双分子荧光互补）实验。

二、 传统方法的局限性

以往，研究员需剪下叶片，在荧光显微镜下切换滤光片，逐一比对 GFP 和 RFP 信号是否重叠。这种方法存在明显弊端：

1. 破坏性采样：一旦制片观察，该叶片便无法用于后续的蛋白提取或表型观察。

   
   

2. 效率低下：面对几十上百个样本，显微镜下的逐个筛选耗时费力。

   
   

3. 定位偏差：离体后的叶片状态与活体存在差异，可能导致蛋白定位信息失真。

   
   

三、 LUYOR 活体双色筛查方案

针对双标实验，上海仪橙提供的 LUYOR-3415RG 双波长荧光蛋白激发光源 提供了的解决方案。

• 设备配置：LUYOR-3415RG 集成了 R 模块（蓝光） 激发 GFP 和 G 模块（绿光） 激发 RFP，配合 LUV-30A（黄镜） 和 LUV-50A（红镜） 眼镜，实现双通道独立观察。

  
  

• 操作流程：

  
  

1. 农杆菌注射后培养 48-72 小时。

   
   

2. 研究员手持 LUYOR-3415RG，先切换至蓝光模式，佩戴 LUV-30A 眼镜，快速扫描叶片，标记发出绿色荧光的区域。

   
   

3. 随即切换至绿光模式，佩戴 LUV-50A 眼镜，观察同一区域是否发出红色荧光。

   
   

4. 若同一区域红绿双显，即为共表达阳性区域。

   
   

• 辅助解剖：确认阳性区域后，无需摘叶，直接用手术刀切取该特定部位（避开叶脉等大组织），立即投入液氮保存。

  
  

四、 核心价值

该方案实现了“活体确认—精准取样"的闭环。相比传统显微镜，LUYOR 便携式系统不仅将筛选效率提升了 5 倍以上，更重要的是保留了样本的完整性，确保了下游蛋白实验的准确性。无论是用于科研论文的数据支撑，还是用于转基因育种的早期筛选。

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