荧光蛋白激发光源在棉花转基因筛选与功能基因标记中的应用

在棉花遗传转化与功能基因组学研究中，转基因植株及体细胞胚胎的高效筛选一直是影响实验进度的关键环节。传统筛选多依赖抗生素/除草剂抗性标记或GUS组织化学染色，存在周期长、破坏样本、难以活体动态观察等局限。绿色荧光蛋白（GFP）及多色荧光蛋白报告系统的引入，为棉花转化事件快速判定、目的基因可视化追踪提供了非破坏性的活体检测手段。

近期，河南大学研究团队在《Frontiers in Plant Science》（2022）发表研究，系统优化了适用于棉花组织的荧光蛋白报告系统，并明确提到利用LUYOR-3415RG手持式荧光蛋白激发光源对转基因棉花样品进行活体荧光观察与快速分选。该研究选取了涵盖绿色（sfGFP、Clover、EYFP、YPet、mVenus）、红色（mCherry、tdTomato）、黄色（mVenus/YPet类）及青色（mCerulean、ECFP）等11种荧光蛋白，在棉花愈伤组织、体细胞胚胎及不同器官中表达验证，其中9种在转基因材料中可稳定、强效表达并遗传。

在具体观测环节，大于约2 cm²的转基因棉花组织（愈伤、胚胎、叶片、种子、根等）可直接使用LUYOR-3415RG进行激发：仪器提供适配GFP/eGFP的蓝光波段与适配RFP（如mCherry、tdTomato）的绿光/黄光波段，配合相应荧光观察滤光附件（如LUV-495A、LUV-590A等），可在无需暗室条件下快速识别阳性信号，并对群体材料进行高通量初筛。该方法尤其适合：

转基因体细胞胚胎与抗性愈伤的早期阳性判定；

成熟转基因棉花各器官（叶、根、纤维、花器）的功能基因表达可视化；

亚细胞定位研究中，对较大组织块或活体材料的快速核查。

所以，借助多色荧光蛋白报告系统与手持式荧光蛋白激发光源，棉花遗传转化过程中的“阳性事件识别—功能基因标记—活体动态观察"可更高效衔接，有助于提升体细胞胚胎利用率与后续表型分析效率。