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LUYOR-3415RG 在农杆菌侵染烟草叶片 GFP 瞬时表达筛选中的应用
LUYOR-3415RG在农杆菌侵染烟草叶片GFP瞬时表达筛选中的应用应用背景在植物瞬时表达系统中,常利用农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)侵染本氏烟(N.benthamiana)叶片,携带35S::GFP或融合GFP标签的外源基因。传统阳性鉴定依赖RT-PCR或荧光显微镜观察,耗时且通量低。利用LUYOR-3415RG手持式荧光激发灯(365nm/450nm双波段)可在暗室中对侵染后叶片直接进行无损GFP荧光初筛,快速锁定阳性克隆。实验简程农杆菌(含...
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UVB诱导HaCaT表皮细胞损伤模型
摘要:在皮肤光老化及防晒化妆品原料体外评价中,建立稳定、可重复的UVB诱导表皮细胞损伤模型是关键前提。本文介绍了利用LUYOR-3200紫外交联仪(UVB,λmax=302nm)对HaCaT人永生化表皮细胞进行定量UVB照射的实验方法,并与传统UV灯箱进行对比,验证了该仪器在剂量控制、均匀性及实验重现性方面的优势。1.引言UVB(290–320nm)是中波紫外线,能引起皮肤红斑、DNA损伤及细胞凋亡,是构建体外皮肤光损伤模型的主要诱导因素。传统开放式UVB灯箱通常依靠计时控制...
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转GFP RFP玉米(转基因)筛选
玉米(ZeamaysL.)是我国重要的粮食作物和饲料作物,转基因技术在抗虫、抗除草剂及品质改良等方面发挥着重要作用。在遗传转化中,GFP常被用作报告基因,用于直观指示外源基因的整合与表达。对于育种企业而言,面对成千上万颗T0代玉米种子,如何快速剔除阴性个体是首要难题。传统的解决方案主要依赖PCR分子鉴定,但该方法存在样本DNA提取繁琐、试剂耗材昂贵、出结果滞后(通常需2-3天)等问题。此外,对于珍贵的转化材料,破坏性取样不利于后续保种。近年来,便携式荧光激发技术的发展为解决这...
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转GFP拟南芥种子快速筛选
摘要:在植物遗传转化与分子育种研究中,对转基因植株进行高效筛选是获得目标株系的关键。传统的PCR鉴定或显微观察法存在周期长、通量低的问题。本文介绍了一种基于LUYOR-3415RG手持式荧光激发灯的拟南芥种子GFP(绿色荧光蛋白)快速检测方法,旨在为种业企业提供高通量、无损化的初筛解决方案。1.引言拟南芥(Arabidopsisthaliana)作为模式植物,广泛应用于基因功能研究与遗传转化实验。在构建过表达或基因编辑株系时,科研人员常利用GFP报告基因来标记目标基因的表达位...
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GDM种业利用LUYOR-3415进行种子荧光分选
GDM种业利用LUYOR-3415进行种子荧光分选近日,巴西GDM种业公司和luyor公司签约采购了多台LUYOR-3415RG便携式双波长荧光蛋白激发光源,巴西GDM种业公司的科研人员利用LUYOR-3415进行玉米、小麦等转基因种子荧光分选。LUYOR-3415RG便携式双波长荧光蛋白激发光源上市以来,不仅服务在动植物的基因研究的科研院所,在育种公司也被得到了广泛的应用,目前,国际种子公司如拜尔、先正达、巴斯夫以及国内的种业隆平高科、丰乐种业等都采用了LUYOR-3415...
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导师说经费紧,我只好把HaCaT细胞拉去“暴晒”了
终于体会到了什么叫“玄学实验”——紫外线诱导的HaCaT细胞损伤模型。简单来说,就是把这群娇滴滴的的表皮细胞拉出去暴晒...看看它们啥时候嗝屁,没嗝的看看为什么还没有嗝,然后我在把栀子果提取物(GFE),看看怎么样能不能把它们救回来。没错,就是这么简单。李老头说他今年没有马x内,不让我花钱,抱着李老头的心态找到了实验室那台“古代”的UV灯,自制了一个破盒子,好了这下我得到一个没有空调的老桑塔纳,仪表盘?没有;油门全凭感觉踩。打开手机倒计时开始,心里默念:“1秒,2秒,3秒……...
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激发光源用于猕猴桃基因研究
近日,浙江农林大学在《springerlink》发表文献题为《GenomesofdiverseActinidiaspeciesprovideinsightsintocis-regulatorymotifsandgenesassociatedwithcriticaltraits》,文献中的实验使用了LUYOR-3415RG便携式双波长荧光蛋白激发光源观察GFP的荧光,使用LUYOR-3415RG激发光源分选阳性的毛状根。文献摘要:RoottransformationandVCc...
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紫外交联仪在Northern Blot及核酸膜固定中的应用
紫外交联仪在NorthernBlot及核酸膜固定中的应用优势分析摘要:在NorthernBlot及SouthernBlot实验中,将凝胶电泳分离的核酸牢固固定在尼龙膜或硝酸纤维素膜上是确保后续杂交成功的关键步骤。传统热烘法存在受热不均、膜变脆、核酸转移等风险。本文结合实际应用,探讨利用LUYOR-3200紫外交联仪进行核酸共价交联的技术优势及其在分子生物学实验中的多功能应用。一、实验背景与痛点在分子生物学实验室中,转膜后的固定处理通常采用80℃真空烘烤2小时或120℃干烤30...
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UVB诱导角质形成细胞(HaCaT)损伤模型构建选择
UVB交联仪(UVCrosslinker)在HaCaT细胞光损伤模型构建中的应用——以栀子果提取物抗光保护研究为例摘要:在皮肤光老化及化妆品活性成分功效评价中,建立稳定可靠的UVB诱导角质形成细胞(HaCaT)损伤模型是关键前提。本文结合中国药科大学与上海君宇生物联合发表在《Cosmetics》上的最新研究,介绍UVB交联仪(UVCrosslinker)在UVB照射剂量控制、HaCaT细胞光损伤模型构建中的应用,并展示其在天然产物抗光保护机制研究中的支撑作用。本文介绍了UVB...
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LUYOR-3415RG便携式双波长荧光蛋白激发光源筛选猕猴桃毛状根GFP转基因
摘要:针对植物转基因材料中绿色荧光蛋白(GFP)表达检测存在操作繁琐、易破坏样本等问题,引入LUYOR-3415RG便携式双波长荧光蛋白激发光源对猕猴桃毛状根进行活体无损筛查。该方法可在普通光环境下快速判别GFP阳性转化体,显著提升筛选效率,已在浙江农林大学相关基因组学研究中得到文献佐证。一、背景与痛点在作物功能基因验证实验中,常采用农杆菌介导的毛状根转化系统,并以GFP作为报告基因。传统检测方式需在荧光显微镜下对组织切片逐一观察,存在制样耗时、样本易污染或失活、大批量筛选效...
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为什么GFP不需要“加油”也能发光
在生命科学研究中,GFP(绿色荧光蛋白)被誉为“活体显微镜”。但与传统的荧光素酶(Luciferase)系统不同,GFP有一个极其反常识的特性:它不需要添加任何底物(Substrate),也不需要辅酶,就能发光。这是为什么?1.起源:来自水母的“发光二极管”GFP最早提取自维多利亚多管水母(Aequoreavictoria)。大多数生物的生物发光(Bioluminescence)依赖于化学反应。例如萤火虫,需要荧光素在酶的催化下氧化才能发光。但GFP不同。它的内部自行形成了一...
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玉米转基因用这个筛选好快
如果有人问我,在单子叶植物遗传转化中,哪个环节最让人头大?我的回答一定是:T0代阳性苗的初筛。那是去年秋天,我们在做玉米(Zeamays)的遗传转化。我们将目标基因与eGFP融合,通过农杆菌侵染幼胚,获得了再生植株。按照惯例,我们需要对再生苗进行阳性鉴定。第一个坑:显微镜装不下。玉米不是拟南芥。拟南芥可以整株压片,玉米的叶片一旦展开,根本塞不进荧光显微镜的载物台。我们只能切根尖、切叶片边缘,做成临时装片。第二个坑:背景噪声。玉米属于C4植物,叶绿素含量高。在488nm激发下,...
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